激光共聚焦顯微鏡[Confocal Laser Scanning Microscope(CLSM或LSCM)]在反射光的光路上加上了一塊半反半透鏡(dichroic mirror),將已經(jīng)通過透鏡的反射光折向其它方向,在其焦點(diǎn)上有一個(gè)帶有針孔(Pinhole)的擋板,小孔就位于焦點(diǎn)處,擋板后面是一個(gè)光電倍增管(photomultiplier tube,PMT)。可以想像,探測光焦點(diǎn)前后的反射光通過這一套共焦系統(tǒng),必不能聚焦到小孔上,會(huì)被擋板擋住。于是光度計(jì)測量的就是焦點(diǎn)處的反射光強(qiáng)度。其意義是:通過移動(dòng)透鏡系統(tǒng)可以對一個(gè)半透明的物體進(jìn)行三維掃描。
激光共聚焦顯微鏡是利用光學(xué)相干斷層成像術(shù),一種高分辨率、非接觸性的生物組織成像技術(shù),能使醫(yī)生在活體上獲得類似于眼組織病理改變的影像,是繼眼科放射、超聲、眼底血管造影診斷后又一全新的影像學(xué)診斷技術(shù)。是通過近紅外弱相干光學(xué)射到待測組織,依據(jù)光的干涉性產(chǎn)生干涉,采用超外差探測技術(shù),測量反射回來的光強(qiáng),用于組織淺表層成像,光學(xué)相干層析成像系統(tǒng)主要由共焦顯微鏡和弱相干干涉儀組成,有一系列的軸向深度掃描建,立OCT圖像,OCT是由低相干光源光纖邁克爾遜干涉儀和光電探測系統(tǒng)等構(gòu)成
激光共聚焦顯微鏡可以對活體組織進(jìn)行原位、無創(chuàng)及實(shí)時(shí)的微結(jié)的探測和成像。因此,在醫(yī)療領(lǐng)域主要有以下幾個(gè)應(yīng)用:
1.對管準(zhǔn)過動(dòng)脈、眼睛及神經(jīng)系統(tǒng)的檢查;
2.提高傳統(tǒng)活檢的檢查準(zhǔn)確率;
3.作為外部介入治療的導(dǎo)向;
4.眼角膜移植手術(shù)中,用激光對眼角膜切合后,利用OCT技術(shù)進(jìn)行移植。